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精子冷冻保存技术该了解下
小编:爱贝代孕网    时间:2017/5/5 16:08:47
     新梦想广州代孕经常负责带领客户去获取精子标本用于代孕工作,那么客户也肯定也想了解一下现阶段的精子冷冻保存技术吧。

     为了避免反复取精术对男性生殖器所造成的损伤,如出血、睾丸纤维化和睾丸萎缩等并发症,微量精子的冷冻也开始受到重视。然而附睾精子因其数量少,细胞膜尚未成熟,精子核DNA的稳定性差,常规慢速冷冻法往往不能达到满意的效果。近年来有研究显示采用特殊冷冻方法可以有效地保存极少量的精子

     微量标本多采用玻璃化法,这种方法存在安全隐患。

     ⒈液滴玻璃化冷冻     用拉细的巴氏吸管吸取一定量的精液标本,巴氏吸管口每形成约8~10μl的液滴后便迅速将形成的液滴滴入液氮,约数秒后,液滴在液氮面上凝固成致密微滴并沉入液氮容器底部,然后依次滴加微滴,直至所有的精子标本全部形成微滴。用预冷的无菌镊子将泡沫盒底部的致密微滴转入 1.8ml的冻存管后,将冷冻管于液氮内冻存。

     结果表明微滴可作为微量精子冷冻的合适载体,微滴法可以替代常规冷冻管法冷冻附睾微量精子,在没有明确增加核DNA损伤的同时能回收较多可利用的精子。

     ⒉冷冻环玻璃化冷冻     冷冻环冷冻是将冷冻环直接浸入含有精子的培养液内,在表面张力的作用下,冷冻环表面形成一层薄膜(体积约3μl),所要冷冻的精子均匀承载在薄膜上,随后直接将冷冻环置于液氮内,10秒后移入冷冻管内,最后液氮内冻存。其复苏后存活率、活动率良好。

     ⒊透明带包装冷冻     有多个研究报道提示利用空的透明带作为载体可以有效地冷冻人类精子,特别是对于严重少弱精患者(例如睾丸穿刺仅能获得1~20条精子的患者)。而且有研究报道,透明带是冷冻严重少弱精患者精子的非常理想的载体,而且使用小鼠和人类卵母细胞的透明带同样有效。

     用透明带作为载体冷冻正常精子标本后精子的回收率高于传统冷冻方法。复苏后的活力、DNA完整性、受精能力与传统冷冻方法类似、

     ⒋朔料毛细管包装冷冻     一项新的研究报道了采用50μl的塑料毛细管作为载体冷冻精子的效果。结果显示用毛细管冷冻复苏后一小时的精子活力、膜的完整性、顶体完整性均显著优于传统的冷冻方法。利用这种方法冷冻精子可以将毛细管放置于0.25ml的麦管内封口,从而保证了冷冻复苏过程中的无菌,能成功地进行玻璃化冷冻而不需要渗透性冷冻保护剂。冷冻前精子用上游法处理,复苏后无需额外处理,可直接用于IVF/ICSI。研究者认为该方法有广阔的应用前景。
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